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库尔勒香梨花粉生活力测定技术

发布人:临沂育果花粉发布时间:2018/12/20

梨花粉的生活力决定了花粉的质量和梨树的坐果率!因此花粉的生活力测定技术是十分重要的!

育果花粉教大家如何给梨花粉做生活力测定实验!

梨花粉生活力测定

一、试材及用具

1.材料:几种植物的不同处理花粉;如:小麦、玉米、大白菜、黄瓜、杏、苹果等。

2.试剂:配制好的缓冲液、联苯胺液、过氧化氢液、TTC粉、蔗糖、琼脂等;

3.用具:显微镜、载玻片、盖玻片、凹面载玻片、玻璃棒、擦镜纸、吸水纸、标签纸、铅笔。

二、方法步骤

(一)直接检验法

每个实验小组选定同品种种株去雄。注意:选用的花蕾最好是花前1~2d,且发育正常、饱满。每天去雄20个花蕾,然后套袋隔离,连续5d,共100朵花。这一实验要和花粉贮藏实验相配合,即花粉贮藏的当天开始去雄。授粉时,每去雄一次,分别授以两种不同贮藏条件下的花粉(各10朵),连续5d,就使得贮藏期分别为当天、第二天、第三天、第四天、第五天的花粉授到了去雄后的花蕾上。实验时,一定要挂牌标好品种、花粉贮藏期、贮藏条件、株号、授粉日期、授粉人。等最后一个处理完后十天,检验结实率和结籽率。将得到的结果填入表1-6。

(二)染色鉴定法(TTC法)

TTC即2、3、5-三苯基四唑氯化物。主要原理在于检验花粉呼吸过程中去氧酶的活性。具有生活力的花粉的脱氢酶,在催化去氢的过程中,把氢转移到其他的物质上去,使用TTC与催化过程中产生的氢结合成红色化合物,从而使具有生活力的花粉变为红色。

1.先配制下列溶液

1)磷酸缓冲液:在100毫升的蒸馏水中,溶解0。832克的磷酸氢二钠和0。273克的磷酸二氢钾,调整PH值为7。17。

2)TTC溶液:称取0.02~0.05克(不同植物所用的量是不同的)的TTC溶解在10ml的磷酸缓冲液中,溶液配好后装入棕色滴瓶内,置入暗处,因氯化三苯基四唑有毒,操作时要注意安全。

2.操作步骤:

1)取少量花粉放在载玻片上,并在花粉上滴上1~2滴配制液,用玻璃棒混合后盖上盖玻片。

2)将载玻片置于恒温箱中(35~40℃)约15~20min。

3)在显微镜(10×10)下观察:凡具有生活力的花粉呈红色,部分丧失生活力的呈淡红色,无色的是死的和不育的花粉粒。

3.观察和测定结果:每片观察3个视野,并统计具有生活力花粉的百分率,填入表1-6。

(三)发芽测定法(培养基培养法)

1.培养基的配制

常用的花粉发芽培养基有液体和固体两种。以前者最为简便。本实验选用前者。其有效成分主要有:蔗糖、硼酸、柠檬酸、赤霉素等。不同的植物所用的蔗糖培养液的浓度是不同的,配制3~30%的蔗糖培养液:在100ml水中,加糖3~30g,加热溶解后,再加0。1%硼酸数滴。

2.制片

取双凹载玻片,滴2滴培养液于槽中,用解剖针挑少许花粉均匀撒于培养液的表面(注意不必搅拌,以防花粉混于液体中因缺少空气而影响发芽,又因花粉深浅不一而在显微镜检查时因光线折射而不易观察。)处理好后,放于一下部添有少量蒸馏水、内有两根玻璃棒的培养皿中(注意不要使水没过载玻片),放到恒温为25℃左右的恒温箱中或室内2h。

3.镜检

将放置2h后的载玻片取出,放在显微镜下观察三个视野,统计总花粉数与发芽的花粉数,然后计算比例,填入下面的表格中。

(四)形态鉴定法

对于新采集的花粉来说,还有一个更为简便的鉴定方法——形态鉴定法。将花粉用解剖针播于一般载玻片上,然后直接放到显微镜下观察,根据形态特征,判断花粉的生活力状况,一般来说,畸形、皱缩、小形化等均为无生活力花粉,而有光泽、饱满、具有本品种花粉典型特征等性状的均为有生活力花粉。

本文编辑:梨花粉厂家主营:梨花粉, 苹果花粉,桃花粉,李子花粉,杏花粉,大樱桃花粉,猕猴桃花粉等果树花粉,咨询电话:15806913322

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